17 Aralık 2017,Pazar
Anasayfa » Tag Archives: Baş

Tag Archives: Baş

Hamilelikte Baş Dönmesi Ol Olur mu?

Hamilelikte baş dönmesi ve bayılma hissi sık yaşanan şikayetlerdir. Hamilelikte baş dönmesi neden olur sorusuna ise cevap aranmalı, görmezlikten gelinmemedir. Baş Dönmesine Sebep Olan Durum Nedir? Gebelikte rahmin fazla büyümesine bağlı rahime giden kan miktarı artar ve bu sebeple beyin gibi diğer vücut organları kanın pompalanmasında güçlük oluşabilir, Bu nedenle bayılma ve baş dönmesi meydana gelebilir. Ayrıca büyüyen rahmin annenin …

Devamını Oku »

Şalgam 2 Mandalina: Kök Kubalı Baş Kek

Bugün Menüde ~ Rhubarb Baş aşağı Kek ve Rhubarb 101 ~ Birkaç dakika daha var mıydı? Rhubarb'ı Kaşkırtmak için yeterli zamanınız var Hızlı, Kolay ve Lezzetli ~ Rhubarb 101 ~ Rhubarb [ROO-bahrb] Karabuğday ailesinin kalın, celerylike sapları 2 feet uzunluğa kadar ulaşabilir. Saplar bitkinin yenilebilir kısmıdır, Yapraklar oksalik asit içerir ve çok toksiktir. Ravar bir meyve olarak yenilmesine rağmen Botanik …

Devamını Oku »

Samsung Galaxy J7 Baş Özellikleri

'; Yeni Ajax ('http://turkcebilgisi.com/wp-content/uploads/2017/05/samsung-galaxy-j7-bas-ozellikleri.orgtr/ajax/specs/showcomments', { PostBody: 'spec_id = 4168', OnComplete: işlev (yanıt) { $ ('Comments_container'). InnerHTML = yanıt; } }).istek(); } Işlev expand_comment (id) { Var disp = $ ('comment_content _' + id) .style.display; If (disp == 'none') { $ ( 'COMMENT_CONTENT _' + id) .style.display = "http://turkcebilgisi.com/wp-content/uploads/2017/05/samsung-galaxy-j7-bas-ozellikleri.org"; $ ( 'C_e_i _' + id) .src = comment_close.src; $ ( 'C_h …

Devamını Oku »

Samsung Galaxy J5 Baş Özellikleri

'; Yeni Ajax ('http://turkcebilgisi.com/wp-content/uploads/2017/05/samsung-galaxy-j5-bas-ozellikleri.orgtr/ajax/specs/showcomments', { PostBody: 'spec_id = 4182', OnComplete: işlev (yanıt) { $ ('Comments_container'). InnerHTML = yanıt; } }).istek(); } Işlev expand_comment (id) { Var disp = $ ('comment_content _' + id) .style.display; If (disp == 'none') { $ ( 'COMMENT_CONTENT _' + id) .style.display = "http://turkcebilgisi.com/wp-content/uploads/2017/05/samsung-galaxy-j5-bas-ozellikleri.org"; $ ( 'C_e_i _' + id) .src = comment_close.src; $ ( 'C_h …

Devamını Oku »

Samsung Galaxy J2 Baş Özellikleri

'; Yeni Ajax ('http://turkcebilgisi.com/wp-content/uploads/2017/05/samsung-galaxy-j2-bas-ozellikleri.orgtr/ajax/specs/showcomments', { PostBody: 'spec_id = 4199', OnComplete: işlev (yanıt) { $ ('Comments_container'). InnerHTML = yanıt; } }).istek(); } Işlev expand_comment (id) { Var disp = $ ('comment_content _' + id) .style.display; If (disp == 'none') { $ ( 'COMMENT_CONTENT _' + id) .style.display = "http://turkcebilgisi.com/wp-content/uploads/2017/05/samsung-galaxy-j2-bas-ozellikleri.org"; $ ( 'C_e_i _' + id) .src = comment_close.src; $ ( 'C_h …

Devamını Oku »

VW emekli baş siparişi Alman savcıları tarafından soruşturuldu

Osterloh'un ücreti inceleniyor. Jan Schwartz Reuters 12 Mayıs 2017 14:27 CET – GÜNCELLEME: 12 Mayıs 15:50 CET – ayrıntıları ekliyor HAMBURG – Alman savcıları Volkswagen'deki eski ve eski yöneticileri şu an şüpheyle Iş konseyi başkanı Bernd Osterloh'a aşırı maaş ödediler. Almanya'da kurumsal fonları boşa harcamak yasal olarak emanet görevinin ihlalidir. Braunschweig savcısı Julia Meyer e-postayla gönderilen bir bildiride, "Braunschweig savcılığının …

Devamını Oku »

Öğrenciler De 'Tükenir' Büşra ATILGAN Tükenmişlik sendromu kavramı, birkaç yıl önce hayatımıza girdi ancak hızla yayıldı. Kişinin kendini 'tüketmesi' anlamına gelen bu kavramı, günlük tempo, yaşanılan olaylar da tetikliyor. Üstelik yetişkin insanlar kadar yoğun ve vaktinde koşturmacası. Peki, sendromla nasıl başlıyor? Öğrenciler yapabilir mi? Yanıtlar, Türk Psikologlar Derneği İstanbul Şube Başkan Yardımcısı Klinik Psikolog Dr. Serap Altekin'den. Günlük stres, iş temposu, okul ve Öğrencilik hayatı derken, kendimizi hep duygusal, hem fiziksel hem de zihinsel açıdan çok fazla yoruyoruz. Öğrenciler; Ders yoğunluğu, sınav stresi, arkadaşları veren rendin a sıra bir de aile basketyle baş etmeye çalışıyor. Bu sıkıntılar kişiyi tükenmişlik sendromuna sürükleyebiliyor. Serap Altekin şöyle diyor: Tükenmişlik sendromu, kişiyi bedensel ve ruhsal açılardan zorlayan hayat olaylarına veya yaşam koşullarına uzun süre maruz kalınması sonucu ortaya çıkan ruhsal, zihinsel, fiziksel bir yıpranma ve Güçsüzleştirme hali. Kişinin uzun süre yorucu ve yıpratıcı bir tempoyla çalışması, yeterince dinlenmeden efor sarf etmesi, rekabetçi bir ortamda performans ve başarı odaklı taleples meşgul olması, bir süre sonra çöküntü ve tükenmişlik getiriyor. Gücümüzün, enerjimizin ve motivasyonumuzun değişkenlikler sergilemesi son derece doğal. Tükenmişlik sendromu tedbiri alabilir bir durum; Onu, altyapısını, nedenlerini ve temel unsurlarını anlamak, önlemek noktasında yardımcı oluyor. Profesyonel atletler, "Susamadan su içmek gerekir. BAŞKALARIYLA KIYASLAMAYIN YGS, LYS, TEOG, vizeler, finaller ve bunlara günlük dersler de eklenince öğrenciler çok yoğun bir Çalışma temposundan geçiyor. Bütün bunlar, riske girmeden tükenmek sendromu. Çünkü öğrenciler bu süreçlerde, bir rekabet ortamında başarı, puan, performans ve sıralama odaklı yüksek standartlara karşı karşıya kalıyor. Aile ve toplum beklentileri ile daha da artıyor ve yıpratıcılık hızlanıyor. Bir kez daha sağlıklı bir davranış. Herkesin performansını ve başarısını kendi koşullarını ölçmek, kendisini mümkün olduğunca başkalarıyla kıyaslamaması koruyucu oluyor. Öğrencinin, "Geçen seneye göre bu yıl neler öğrendim, geçen aya kıyasla bu ay ne kadar hızlandım, düne göre bugün hangi konularda daha iyiyim?" Gibi gelişimini kendi içerisinde daha fazla sağlıklı. Bir de en önemlisi, almadı ya da sınav derecesiyle kendini özdeşleştirmemek. Değil, puan, sıralama; Ibaret sadece bir kere yapmak. ACABA TÜKENİYOR MÜYÜK? Tükenmişliğe neden emin olmalı, henüz erişmek için gibi insanlara yet gibi davranıyorlar mı? Öğrencilerde de benzer. Ama ders programı, ek derslerin, etüt saatlerinin yoğunluğu, daha fazla yükseğe çıkarılmış hedef ve beklentiler, rekabet ortamı, burs gibi birçok etken öğrencilerin üzerindeki baskıyı ve yıpranma payını da maksimuma çıkarıyor. Buna monotonluk, yalnızlık ve sosyal desteğin yetersizliği gibi yeni bir boyut eklenince risk artıyor. Yeterince mola vermemek, dinlenmemek, sağlıklı ve dengeli beslenmemek de riski arttırmak da önemli bir faktör. Kısa vadede yaşanan performans, başarı, puan, derece, prestij, statü, takdir ve onay gibi tatmin kaynakları ve bu anlam anlamı yitirmiş oluyor. [19459107] FİZİKSEL BELİRTİLER: Enerjisizlik, kronik yorgunluk, güçsüzlük, baş, mide, bel ve felsefe ZİHİNSEL BELİRTİLER: Umutsuzluk, ZİHİNSEL BELİRTİLER: Umutsuzluk, DUYGUSAL BELİRTİLER: DUYGUSAL BELİRTİLER: Bu yazı, ] Ağırlıklı olarak stres ve depresyon belirtilerine benzerlik gösteriyor. [19459106] Kimler, risk altında mı? Klinik Psikolog Dr. Serap Altekin'e göre, durum, olay ve iş koşullarının özellikleri kadar, insanın kendi kişiliğiyle ilgili unsurlar da tükenmişlik sendromunun altyapısını oluşturuyor. Dr. Altekin, daha fazla risk taşıyan kişileri şöyle sıralıyor: * Yüksek idealler taşıyanlar, * Mükemmeliyetçiler, * 'Hayır' demekte zorlananlar, * Yüksek sorumluluk ve çarpma iyi görev bilincindekiler, * Diğer insanların beklentilerini ve * Kendini suçlamaya ve yargılamaya eğilimliler, * Kolayca yetersizlik duygusuna kapılabilenler, * Sosyal destek sistemleri az olanlar.

SENDROMUNUZLA NASIL BAŞ EDEBİLİRSİNİZ ] – Yemek ve uyku düzenleyin dikkat edin. – Mizaha vakit ayırın. – Daha fazla hareket edin, spor yapın. – Hobi edinin. – İnsan teması her zaman şifa ve güç kaynağıdır, arkadaş ve dostlarınızla buluşun, konuşun, paylaşın. – Sadece koşullar elveriyorsa yaratıcılık ve esnekliğe izin verin. – İhtiyaç duyduğunuzda yardım ve destek istemekten çekinmeyin. – Koşullarınız …

Devamını Oku »

Hyundai, Baş Marka Altındaki Taksi Segmentine Otomobil Satışı Yapıyor; Yeni Xcent Değil Taksi Piyasası İçin

                         Yeni Hyundai Xcent facelift'in piyasaya sürülmesi ile Koreli üreticinin bir başka girişimi var. Şirket şimdi 20 Nisan 2017'de başlatılan yeni Xcent'in yalnızca bireysel alıcıları hedef aldığını ve Hindistan'daki filoya veya taksi bölümüne satılmayacağını resmi olarak bildirdi. Bu, Mart ayında Hyundai'nin taksi pazarında Xcent öncesi hazırlığı yapmaya devam edeceğini söylerken bildirdiğimiz şeyin haklılığını gösterdi. Hyundai, şimdi bu arabaları Prime markası …

Devamını Oku »

Junkyard "butt-thumper" subwooferlar garaj ses sistemine ucuz bas ekliyor

     Paylaşın      Facebook          Tweet          Pinterest          E-posta             Arabayı yıkım alanlarında fotoğraflamak için çok fazla zaman harcadığımdan, aynı anda bazı alışveriş yapacağımı düşünüyor. Garajım, hem Lexus LS400 hem de SC400 tavana monte subwoofer hoparlörlere sahip büyük ve karmaşık bir hurdalık parça imal ses sistemine sahip ancak, Paul Wall'un son modelini benim son Honda'da oynarken yeterli düşük …

Devamını Oku »

Katolik Okulları Suck Eden Neden 8 Nedenler Thought.is Nereden geldim, Katolik okullar pratikte norm. Bazı arkadaşlarım Katolik okulundaki mutlu yıllarından ötürü Katoliklikten ayrıldıklarını ifade ettiler. Hâlâ daha yüksek bir güç, belki de Tanrı'nın varlığına inanırken, anladım ve kızgınlıklarını paylaşıyorum. İster sevilsin ya da sevmeyin, bir Katolik okulunda eğitim görürken büyüdüyseniz, muhtemelen neden bahsettiğimi bileceksiniz. Ancak yine belki de deneyimleriniz farklıdır. Bana gelince, Filipin Katolik okullarının neden emildiği 8 nedeni var: 1. Doğal Hareket yerine Alışkanlık olarak Namaz. Her gün dersler başlamadan önce bayrak töreni sırasında 15 dakikalık bir dua toplantısı düzenledik ve bu da okul saat 6:30 gibi erken saatlerde olmamız gerektiğini gösteriyordu. Eğer namaz başlamış olsaydınız sonra geldiyseniz, üç kez geç kaldıysanız, bir günün yokluğuna tekabül edecek bir "gecikmeli kayma" alırsınız. Gün boyunca, her sınıftan önce ve sonra dua edelim, bu yüzden 6 sınıfa sahip olsaydık, bu otomatik olarak 12 ibadet eder. Ayrıca, öğle molasında ve öğle molasında yemek öncesi dua ettik. Öğle yemeğinden sonra The Angelus adlı özel bir duayla öğleden sonra The 3 O'Clock Namaz adlı başka bir özel dua vardı. Eğer Ekim (Raserse'nin ayı) ise, o zaman her gün tespih ederiz. Yalan söylemeyeceğim. Ben ve sınıf arkadaşlarımın birçoğu dua yığını anıla okudu ve gerçekten niyetle ya da kalpten dua etmedi. 2. Zorbalığa Rahat Tolerans. Anaokulundan üniversiteye kadar Katolik okuluna geldim. Filipin'deki en iyi okulların çoğunluğunun Katolik mülkiyetinde olması nedeniyle gerçekten seçeneğiniz yok. Toplamda, 4 farklı Katolik okuluna gittim. Hepsinin kabadayılıklarla uğraşmak için berbat yöntemleri vardı. Lise döneminde bir grup kız öğrenci birkaç öğrenciye zorbalık yapmaya devam ediyordu. Faktöre harekete geçmeden çok, gerçekten çok zaman aldı ve sadece bir okul arkadaşıyla neredeyse fiziksel olarak istismar edilen bir olay tırmandı. Zorbalığa birkaç gün askıya alındı ​​ve hiçbir şey daha proaktif olmadı. Okul, zorbalık hedefleri için asla danışmanlık hizmeti sunmadı. Üniversitede bunu kendim yaşadım. Bir sınıf arkadaşı (ve daha sonra bir arkadaşı) bana öğretmen ve diğer öğrencilerin önünde bağırarak zorbalık etti ve beceriksizce komik olduğunu düşündüğü için öğretmen hiçbir şey yapmadı ve daha sonra güldü. Bu olay diğer olaylara tırmandı. Yine, okul şikayetlerine rağmen hiçbir şey yapmadı ve yalnızca hukuki işlem başlatmak için tehdit edince onlara başvurdu. Öğrenci İşleri Şefi, "Hıristiyan yolu" olduğu için, kabadayı "affet" etmem için ve sorun yaratmamak için "yalvarırım" diye yalvardı. "Öğrencilerin okula devretmek istediğimden dolayı davamı düşürdüğümde (evet, O kötü), aynı zorbanın fiziksel olarak başka bir sınıf arkadaşına saldırdığını duydum. Hayır, kaydında bir erteleme ya da işaret almadı. Bana yaptığı ve diğer sınıf arkadaşı için yaptığı tek şey, değersiz, samimi olmayan bir özür dilemekti. 3. Okul İtibarıyla İlgili Endişeler Katolik okulları, Hıristiyan değerlerin geliştirilmesine yönelik bir tespite rağmen, gelirleri ve itibarları ile daha fazla ilgileniyor gibi görünüyor. Daha önce de belirttiğim gibi, eski okulum şarj cihazlarına basmamamı istedi ve belli bir şeyin medyaya veya halka sızmasına izin vermemek için elinden gelen her şeyi yaptım. Üniversite bölümünün gazetesinde yer aldım ve okulun ya da bedeninin eleştiren herhangi bir makalesi daima öfkelendi ya da gazeteden çıkarılmaya çalışıldı. Farklı bir Katolik Üniversitesi'ne geçtiğimde okul gazetesine de kaydolmuştum. Rahibeler ve rahipler gazeteciliğimizde bizi "şeffaf" olmaya teşvik etti ancak gazetemizin bir baş rahib tarafından kontrol edilmesini ve öğrencinin bedenine gönderilmeden önce onaylanmasını talep ediyordu. Yine, okulu olumsuz yönde etkileyen makaleler, öğrenci bütçesinde yansımayan bazı eksik öğrenci ücretleri üzerine soruşturma parçaları, dükkanlardaki veya kantindeki eşyaların neden aşırı fiyatlandırıldığını bulmak için malların arızalanması, mülakatlar Öğrencilerin yayınladığı şikayet vb. Burada bir desen görebilirsiniz. Son zamanlarda tanıdıklarımın Facebook postasında tökezledi. 14 yaşındaki kızkardeşinin bir öğretmen tarafından nasıl zorbalığa uğradığını açıkladı, ancak okul öğretmeni cezalandırmadı. Bu, Facebook olayını yazana kadar yayınlandı ve viral hale geldi.

Aynı şey, başka bir öğrenciye karşı cinsel taciz şikayetlerini göz ardı eden ve başka bir Katolik okulundaki başka bir öğrenciye oldu ve öğrencinin kardeşinin Facebook yazığı zaman dinlendi (yarım asmış olsa da) Viral gitti. 4. Elbise Kodlarını Kontrol Etme. Kostüm kodlarının veya üniformaların kadın düşmanı ve klasist olduğuna nasıl inanıyorum. Bu, bütünüyle başka bir tartışmaya ihtiyaç duyuyor. Katolik okullarının takıntılı …

Devamını Oku »

Hamilelikte Baş Dönmesi Ol Olur mu?

Hamilelikte baş dönmesi ve bayılma hissi sık yaşanan şikayetlerdir. Hamilelikte baş dönmesi neden olur sorusuna ise cevap aranmalı, görmezlikten gelinmemelidir. Baş Dönmesine Sebep Olan Durum Nedir? Gebelikte rahmin fazla büyümesine bağlı rahime giden kan miktarı artar ve bu sebeple beyin gibi diğer vücut organlarına kanın pompalanmasında güçlük oluşabilir, Bu nedenle bayılma ve baş dönmesi meydana gelebilir. Ayrıca büyüyen rahmin annenin …

Devamını Oku »

Chevrolet Camaro V6 1LE, BMW M2 Go Baş 2 Kafa izle

Amerikan kasları başka bir BMW M otomobilinden daha iyi performans gösterecek mi? Ücretsiz Fiyat Teklifi bir Yerel Bayi No Obligation, Hızlı ve Basit Ücretsiz Yeni Araç Alıntı Aracı Değiştir Marka Seç Acura Alfa Romeo Aston Martin Audi Bentley BMW Buick Cadillac Chevrolet Chrysler Dodge Ferrari FIAT Ford Genesis GMC Honda Hyundai Infiniti Jaguar Jeep Kia Lamborghini Land Rover Lexus Lincoln …

Devamını Oku »

Tesla, Baş Bilgi Görevlisi olarak Juniper'ın Gary Clark'ı seçti

Juniper Networks'in eski BT baş teknoloji yetkilisi olan Gary Clark, Clark's LinkedIn profiline göre Şubat ayında Tesla A.Ş.'ye enformasyon sorumlusu olarak katıldı. Clark, kendi girişimini – Stealth Startup Company'yi başlatmak için geçen yılın Ocak ayında elektrikli otomobil üreticisinden ayrılan Jay Vijayan'ın yerine geçecektir. Tesla, derhal yorum için mevcut değildi. Clark Üniversitesi'nden bilim masterı ile mezun oldu. Daha önce Barclays Global …

Devamını Oku »

Kan Portakalı Baş aşağı Kek

Bugün Menüde ~ Kan Portakalı Baş aşağı Kek Son zamanlarda, Bakkal alışveriş, Üretim bölümünde, Büyük beyaz bir işaret gördüm. Büyük, kırmızı-turuncu harflerle yazılmış, Kelimeleri şöyle: KAN ORANGES … Onları gitmeden önce al! Şey, büyük karton kutuya doğru yürüdüm ve İki, 5 libre çanta kan portakalı aldım .. … hepsi gitmeden önce … Ayrıca, bir çanta için 0,99 dolara beş, 16 …

Devamını Oku »

PD1'in kristal yapısı, Haemophilus yüzey fibrili (Hsf) olağandışı büyük bir üçlü ototransporterdir En öldürücü soylar H tarafından eksprese edilen yapışkan (TAA). Influenzae . Hsf'nin patojen ve konukçu arasındaki yapışmaya aracılık ettiği bilinmektedir ve epiglotit, menenjit ve pnömoni gibi potansiyel olarak ölümcül hastalıkların kurulmasına izin verir. Yakın tarihli araştırmalar bu TAA'nın yeni bir 'saç tokası benzeri' bir mimari oluşturabileceğini önermekle birlikte, yüksek özünürlüklü yapısal veriler bulunmayan Hsf'nin karakterizasyonu silico modelleme ve elektron mikrograflarında ile sınırlı olmuştur. Burada, Hsf varsayımsal alan 1 (PD1) 'in kristal yapısı 3.3 Â çözünürlükte bildirilmektedir. Yapı, beklenmedik bir N-terminal TrpRing alanının mevcudiyetini açığa vurarak önceki alan açıklamasını düzeltir. PD1, çözülecek olan ilk Hsf alanını temsil eder ve böylece 'saç tokası benzeri' hipotez üzerine daha fazla araştırma yapılmasını sağlar. Anahtar Kelimeler: Hsf varsayımsal alan adı 1, trimerik ototransporter, Haemophilus influenzae adezin, hücre adhezyonu, Haemophilus yüzey fibril 1. Giriş Haemophilus influenzae üst solunum yolu enfeksiyonlarına, pnömoniye ve akut menenjit (Danovaro-Holliday ve ark. 2008 ; Murphy'ye bağlı enfeksiyonlara neden olan Gram negatif fakültatif anaerobik bir bakteridir ve diğerleri 2009 ). Farklı suşları H. Influenzae ya a-f serotiplerine, ikincisine de tipik olmayan olarak tanımlanan (Barenkamp ve St Geme, 1996 ) alt bölümlere ayrılmış şekilde kapsüllenmiş ya da kapsül içine alınmamıştır. H. Influenzae enfeksiyon, birçok pilus ve nonpilus yapışkan faktörlerin aracılık ettiği bir süreçte patojenin konak epitel hücresi astarlarına ve çeşitli ekstraselüler matriks (ECM) proteinlerine ( örneğin vitronektin) yapışmasıyla kurulur (Cotter ve diğerleri 2005 Virkola ve diğerleri 2000 ; Hallström ve diğerleri 2006 ). Yapışma, bakterinin konakçı tarafından temizlenmesini önlemesine izin verir ve sayısız virulans mekanizmaları yoluyla derin yerleşimli bir enfeksiyonun kurulmasını kolaylaştırır . Tüm suşları H. Influenzae patojeniktir, 1990'lı yıllarda etkili bir aşı kullanımına başlamadan önce hastanın morbidite ve mortalitesinin en yüksek oranlarından sorumlu olan virülan tip b (Hib) 'dir. Hib tarafından kullanılan böyle bir virülans faktörü, daha iyi karakterize edilmiş bir başka H ile önemli homoloji paylaşan bir trimerik ototransporter adhesin (TAA) proteini olan Haemophilus yüzey sarmalı (Hsf) dir. Influenzae ve diğerleri ve diğerleri 2015 (19459019). TAA'lar olarak bilinen HIA (Cotter ve ark. Salgılanan proteinlerin tip V ailesinin bir parçası olan, doğrusal bir fibril 'lollipop' yapısında düzenlenmiş üç ana alan türüne sahiptir. Baş ve küre alanları, hücre dışı bölgede N-terminüsünden serpiştirilir. YadA benzeri (YIhead) alanlar (Nummelin ve ark. 2004 gibi) ya çapraz mimarilere sahip β-tabakalardan oluşan ön alanlar ya da Triptofan halkası (TrpRing) alanları (Szczesny ve diğerleri 2008 (19459019)), tipik olarak proteinlerin yapışkan aktivitesine aracılık etmektedir. Sap, süper sargının derecesine ve yönüne (Hernandez Alvarez ve ark. 2010 ) bağlı olarak hepartan'tan pentadecad'a değişen periyodik üçlü üç boyutlu sargılı bir yapı oluşturur. Son olarak, C-terminal translokatör alanı, her bir altbirim bir amfipatik alfa-helis artı dört β-tabakaya katkıda bulunan bir trimerik β-namludur (Meng ve ark. 2008 ). Bu alan, proteinin geri kalan kısmının zar yoluyla translokasyonundan sorumludur ve tüm TAA'larda bulunur (Lehr ve diğerleri 2010 ). Son zamanlarda yapılan araştırmalar, Hsf'nin EM görüntülerine dayanan görünüşte yeni bir 'saç tokası benzeri' yapıya sahip olduğunu öne sürdü ( Singh ve diğerleri 2015 ). Paylaşılan bölgelerinde, Hia ve Hsf'nin% 72 sekans özdeşliği vardır (Hia161-1098 ve Hsf1484-2413, Ek Şekil S1), ancak tam uzunlukta trimerik Hsf (~ 750 kDa), Hia'nın (~ 340) iki katından daha büyüktür KDa). Hia'nın iki bağlayıcı alanı (HiaBD1 ve HiaBD2) de Hsf'de tanımlanmıştır (Laarmann ve diğerleri 2002 ); Bununla birlikte, Hia'nın aksine, Hsf'nin ek bir bağlanma alanı (HsfBD3) ve üç varsayımsal alanı vardır, yapısı ve fonksiyonu bilinmemektedir. Dahası, Hsf'nin alanlarını modellemeye yönelik sınırlı bir in silico yaklaşımı, ~ 200 nm'lik doğrusal bir TAA olmasının muhtemel olduğunu ortaya koymuştur (Singh ve diğerleri 2015 ). Buna rağmen, Hsf'nin elektron mikrografları H'de ifade edildi. Influenzae RM804 Hsf'yi doğrusal bir TAA olarak değil çift katlı bir saç tokası halkası yapısı olarak göstermiş görünüyor. Alan dizilişinin haritalanması, Hsf'nin N-ucunun zarın yakınında bulunması ve 'kıl tokası benzeri' hipotez ile tutarlı olmasını önerdi. Yapışkan işlevine ek olarak, Hsf'nin bağlandığı gösterildi. Kompleman inhibitörü vitronektin (Vn): etkileşim, HsfBD2 ve C-terminali Vn kalıntıları 352-374 ile eşleştirilmiştir (Hallström ve diğerleri 2006 ; Singh ve ark. 2014 ). Hem serumda hem de ECM'de bulunan bu glikoproteinin kazanılması, H'yi sağlar. Influenzae kompleman sisteminden kaçınmak ve epitelyal yüzeye daha iyi yapışmak suretiyle bakteri virülansını arttırmaktır. Bu kısmen Hia'nın aksine Hsf'nin en öldürücü, tiplendirilebilir H suşlarında ifade edildiğini açıklayabilir. Influenzae . Burada, bir Hsf varsayımsal alanının (PD1) kristal yapısını bildiriyoruz. Bu yapı, PD1, N-TrpRing: KG: TrpRing-C için yeni bir alan düzenlemesi ortaya çıkarır ve bu nedenle daha önce silico dizi analizi ile tanımlanan alan mimarisinin yerini alır. Bu çalışma, bu TAA'nın varsayımsallaştırılmış yeni 'saç tokası benzeri' yapıyı (Singh ve ark. 2015 kabul ettiği) belirlemek için Hsf'nin tam uzunluklu yapısını belirlemek için sürekli bir çaba oluşturmaktadır. 2. Gereçler ve yöntemler 2.1. Makromolekül üretimi 2.1.1. PD1-GCN4 Hsf alanı PD1, iki GCN4 bağlantı proteini arasında klonlandı. GCN4, doğal haliyle sargı bobini dimerini oluşturan iyi tanımlanmış bir maya transkripsiyon faktörüdür. Bununla birlikte, hidrofobik çekirdeğindeki spesifik kalıntıların mutajenezi GCN4'ün çeşitli oligomerik durumları benimsemesine olanak tanır. Bu nedenle, kararlı oligomerizasyonu kolaylaştırmak için füzyon proteinleri için ortak olarak GCN4 varyasyonları sıklıkla kullanılır. Bu durumda, fikir, HsfPD1'in dengeli trimerleşmesini kolaylaştırmak için hem N- hem de C-terminusuna iyi karakterize edilmiş trimer oluşturan bir GCN4 varyantı eklemek olmuştur (Hernandez Alvarez ve diğerleri 2008 (Hartmann ve diğerleri 2012 Koiwai ve diğerleri 2016 ) Lupas grubunun başarıyla kullandığı gibi. Bu füzyon proteini, PD1-GCN4, restriksiyonsuz (RF) klonlama kullanılarak üretilen bir pIBA-PD1-GCN4tri-His 6 plazmidinden eksprese edildi. PD1 geni, bir pET-16b- hsf polimeraz zincir reaksiyonu ile, 1-2414 plazmid. Primerler, hedef vektör olan pIBA-GCN4tri-His 6 (19459034) (Tamamlayıcı Tablo S1) tamamlayıcı çıkıntıları olan PD1 genini içeren bir 'megaprimer' üretmek üzere tasarlandı. 6 XhoI (New England Biolabs) ile restriksiyon sindirimi ile lineer hale getirildi ve PD1 genini (bunun içinde bulunan PIBA-GCN4tri-His 'Megaprimer') plasmid içine sokun. PD1-GCN4 ekspresyonu, 4 saat süreyle 8.6 μl M nihai konsantrasyona bir anhidrotetrasiklin hidroklorürün eklenmesiyle 0.6 OD 600 de indüklendi. Hücreler 193 K'de gece boyunca saklanan santrifüjleme (2000 g ile 10 dakika süreyle 277 K'de) ile toplanmış ve 50 m M 'den oluşan tampon [NaH 4 500 m NaCl, pH 8.0, 500 m . Hücreler sonikasyon ile parçalanmış ve süpernatanlar santrifüjleme (1600 g ile 10 dakika 277 K'de) ile toplanmıştır. Protein, immobilize metal iyon-afinite kromatografisi (IMAC) ile saflaştırıldı. PD1-GCN4 ihtiva eden temizlenen süpernatant, daha önce tampon A (2 x 6 ml; üç kolon hacmi) ile dengelenen bir Ni-NTA agaroz sütunu (GE Healthcare) üzerine tatbik edildi ve ajitasyon ile 1 saat süreyle bağlanmasına izin verildi. Proteinler, 50 m

NaH [500.04] NaCl'den oluşan tampon B ,% 10 gliserol, 300 m imidazol pH 8.0. Saflaştırılmış proteinin kalitesi, çok açılı bir lazer ışığı saçan (SEC-MALLS) aparatına (Şekil 1) bağlanan boyut uzaklaştırma kromatografisiyle değerlendirildi a ). SEC-MALLS, 50 m'lik Tris, 500 mM'lik NaCl, 50 mM Tris, 1 mM NaCl ve 1 mM NaCl'den oluşan tampon C ile dengelenmiş bir Superdex 200 5/150 …

Devamını Oku »